TLC薄层层析技术
TLC薄层层析技术
定义:将固定相与支持物制作成薄板或者薄片,流动相流经该薄层固定相而将样品分离的层析系统。
比移值(Rf):
Rf=溶质的最高浓度中心至原点中心的距离/溶剂前沿至原点中心的距离
TLC薄层层析技术

点样:
点样原点小而圆,直径尽量不超过2mm
在便于显色的前提下,点样量尽量少,防止过载拖尾或者掩盖附近的点
点样勿伤及薄层表面
点样原点尽量远离薄层边缘,至少相隔3mm,减少边缘效应
选择规则的矩形薄板
所有点样要保持在一条与底边平行的直线上
点完样后,溶剂用电吹风尽量吹干
TLC薄层层析技术

展开:
尽量用新配制的展开剂
展缸盖子密封性要好
展开剂用量适中,不能浸过点样原点
薄层板侧边不能贴到展缸侧壁
薄层板尽量用镊子夹住小心放入展缸中,而不是用手 理想的展开位置保证Rf值在0.2-0.8之内
TLC薄层层析技术

看板(一看、二照、三碘、四显):
用镊子小心去除薄板,吹干溶剂
首先在日光下观察,划出有色物质的斑点位置
在紫外灯下观察有无暗斑或荧光斑点
大部分有机物会吸附碘,产生棕色或黄色斑点 既无色又无紫外吸收的物质,可以用显色剂显色(磷钼酸、高锰酸钾
常用正相溶剂极性大小
正庚烷(石油醚)<CH2CL2<四氢呋喃<丙酮<乙酸乙酯<乙腈<甲醇<水
常用正相溶剂组合
EA/PE,DCM/MEOH,PE/DCM,PE/Acetone,EA/DCM